Qodobbada faragelinta ee ku jira falcelinta PCR

Inta lagu gudajiro falcelinta PCR, qaar ka mid ah qodobbada faragalintu badanaa waa la kulmaan.
Sababta oo ah xasaasiga aad u sarreysa ee PCR, faddarayn waxaa loo tixgeliyaa inuu yahay mid ka mid ah qodobbada ugu muhiimsan ee saameeya natiijooyinka PCR oo soo saari kara natiijooyin wanaagsan oo wanaagsan.
Sidoo kale waa ilaha kala duwan ee horseedda natiijooyin diidmo ah oo been abuur ah. Haddii hal ama in ka badan oo muhiim ah oo ka mid ah isku-darka PCR-da ama falcelinta cod-weyne laftiisu waa la xakameeyaa ama la farageliyaa, ogaanshaha cudurka ogaanshaha waa la horjoogsan karaa. Tani waxay u horseedi kartaa hufnaan hufan oo xitaa natiijooyin diidmo been ah.
Ka sokow xannibaadda, luminta luminta sharafta nucleic acid waxay ku dhici kartaa sababtuna tahay dhoofinta iyo / ama xaaladaha kaydinta kahor diyaarinta muunadda. Gaar ahaan, heerkulka sare ama kaydinta aan ku filneyn ayaa horseedi kara waxyeelo unugyo iyo aashitada nucleic. Hagaajinta unugyada iyo unugyada ee loo yaqaan 'paraffin-ka' ayaa si fiican loo yaqaanaa sababaha kala goynta DNA iyo dhibaato joogto ah (eeg tirooyinka 1 iyo 2). Xaaladahan, xitaa go'doominta ugu habboon iyo nadiifinta ma caawin doonaan.

Jaantus 1 | Saamaynta ISRIOBITIONIMIRLIRGIRTION OO KU SAABSAN DANKA DNA
Agarrose Gel Encerophoresis wuxuu muujiyey in tayada DNA-da laga go'day ee ka soo baxa qeybaha paraffin ee paraficos-ka si weyn u kala duwan. DNA ee dhererka dhexdhexaadka kaladuwan ee kaladuwan ayaa goob joog ka ahaa soosaarka iyadoo kuxiran habka hagaajinta. DNA waxaa la keydiyey oo keliya markii lagu xalliyo saamiyo la qaboojiyey oo dhaladka ah oo ku dhex jira in ay ku jiraan dhexdhexaadnimada. Adeegsiga sicir-bararka adag ee loo yaqaan 'acicict' oo sicir barar ah ama aan la xakamayn karin, aashitada qaab-dhismeedka-ku jira ee 'Fill -in' ayaa sababay khasaare weyn oo DNA ah. Jajabka haray ayaa si aad ah u kala jajaban.
Dhanka bidix, dhererka jajabyada waxaa lagu muujiyaa lammaanaha kiloban (kbp)

Jaantus 2 | Luminta sharafta bartilmaameedka nucleic acid
(a) farqiga 3-5 'ee xargaha labada dhinacba waxay ku dambayn doonaan nasasho ku dhagan bartilmaameedka DNA. Isku-darka DNA-da ayaa weli ku dhici doona jajabka yar. Si kastaba ha noqotee, haddii goobta ugu horreeysay ee goobta ku baahsan ay ka maqantahay jajabka DNA-da, kaliya cod-weyne saxeexan oo keliya ayaa dhacda. Kiiska ugu habboon, jajabku waxay dib u bilaabi karaan midba midka kale, laakiin waxsoosaarku wuxuu noqon doonaa heerarka baaritaanka yar iyo kuwa ka hooseeya.
(b) Geeds luminta, inta badan sababtuna tahay propectination iyo qaab-dhismeedka tarankaaga, waxay horseedaa hoos u dhac ku yimaada tirada H-Bonds-ka iyo hoos udhaca TM. Intii lagu gudajiray wejiga diirinta kuleylka ee dheer, hordhaca ah ayaa ka dhalaali doona matrix DNA mana baabi'i doonaan xitaa xaaladaha adag.
(c) Saldhigyada kombuyutarka ee ku dhegan ee kumbuyuutarka ku dheji
Dhibaatooyinka kale ee caanka ah ee inta badan ku dhaca baaritaanka molikalalar waa siidaynta ka yar-aan ka badneyn ee aashitada nucloic acids acids acids ee la barbardhigo soosaarka 'phenol-chloroform'. Xaaladaha aadka u daran, tani waxay la xiriiri kartaa diidmo been ah. Waqti badan ayaa lagu keydin karaa karkarinta 'resis' ama dheefshiidka qulqulka ama dheefshiidka burburka ee burburka unugyada, laakiin habkan ayaa inta badan ku keenta dareenka hoose ee PCR-ka oo aan ku filnayn sii-daynta nuccic-ka oo aan ku filnayn.

Xaraashka dhaqdhaqaaqa polymarese inta lagu jiro cod-codku

Guud ahaan, xannibaadda waxaa loo isticmaalaa fikrad weel ah si loo sharraxo dhammaan qodobbada u horseeda natiijooyinka 'Coloptimal PCR'. Dareenka dabiiciga ah ee xasaasiyadda ah, xannibaadda ayaa ku xaddidan waxqabadka enzyme, ie, waxay yareysaa ama waxay ka hortagtaa beddelka shey-tacliinta ee 'polymoterase' ama cofeast-ka (tus.
Waxyaabaha ay ka kooban yihiin muunadda ama alaabada kaladuwan iyo soosaarka ay ku jiraan reagents ayaa si toos ah u xakameyn kara enzyme ama dabinka edta), taasoo ah in ay u horseedaan inay yaraato ama been abuurka PCR.
Si kastaba ha noqotee, is-dhexgalyo badan oo ka dhexeeya qaybaha fal-celinta iyo bartilmaameedka aashitada nucleic-ka ee aashitada nucleic-ka waxaa sidoo kale loo qoondeeyay 'cudurada cudurada PCR'. Mar haddii daacadnimada unugyada ay carqaladeeyaan go'doominta oo nucleic acid waa la siidaayaa, is-dhexgalka ka dhexeeya muunadda iyo xalka ku wareegsan iyo wajiga adag ayaa dhici kara. Tusaale ahaan, 'Scavengers' ayaa ku xiri kara DNA-ga hal ama laba-laab ah oo ku saabsan isdhaxgalka aan-damacsaneyn oo faragalin ku sameeyo go'doominta iyo nadiifinta iyadoo la yareynayo tirada bartilmaameedyada ee ugu dambeyntii gaadho weelka falcelinta ee PCR.
Guud ahaan, xakameynta PCR-da ayaa ku jira inta badan dareeraha jirka badankood iyo reathers loo isticmaalo baaritaanada baaritaanka kiliinikada (kaadida.

Qabyo inbadan oo ka hortaga prtchia waxaa laga heli karaa bakteeriyada iyo unugyada Eukaryotic, DNA-yada aan bartilmaameedsanayn DNA, DNA-ku-xirashada Macromololecules ee matrices-ka iyo qalabka sheybaarka sida galoofyada iyo balaardka. Nadiifinta aashitada nucleic inta lagu gudajiro ama ka dib soosaarka ayaa ah habka loo doorbido ka saarida xad-dhaafka PCR.
Maanta, aalad soo saarid otomaatig ah oo otomaatig ah ayaa beddeli kara borotokool badan oo gacanta ah, laakiin 100% soo kabasho iyo / ama nadiifinta bartilmaameedyada waligood lama gaarin. Waxyaabaha xakamaynta ee suurtagalka ah ayaa wali laga yaabaa inay wali ku jiraan acids nucleic nadiif ah ama laga yaabo inay horay u dhaqan galeen. Xeelado kaladuwan ayaa jira si loo yareeyo saameynta ka hortagga. Xulashada polymarese ee ku habboon ayaa saameyn weyn ku yeelan kara hawsha inrihitor. Habab kale oo la xaqiijiyay oo lagu yareeyo xannibaadda PCR ayaa sii kordhaya feejignaanta polymerase ama codsashada waxyaabaha lagu daro sida BSA.
Xaraashka falcelinta PCR waxaa lagu muujiyaa adeegsiga xakameynta tayada tayada gudaha (IPC).
Daryeel waa in la qaataa si meesha looga saaro dhammaan reagings iyo xalka kale ee xirmada soo saarista, sida etta, COSCLOL, SDS, SDS, Laga soo bilaabo PheNol, oo ka go'day nuqulka nucleic, oo ka go'do nuqula aashito ah tilaabo dhalasho oo dhaan ah. Waxay kuxirantahay feejignaantooda, way dhaqaajin karaan ama xakameyn karaan PCR.