Hagaha Sayniska Xagaaga: Marka Mowjadda kulaylka 40°C ay la kulanto Tijaabooyinka Molecular

Heerkulka sare ayaa ka socday inta badan Shiinaha dhawaanahan. Bishii Luulyo 24-keedii, Kormeeraha Saadaasha Hawada Gobolka Shandong ayaa soo saaray digniin heerkul sare oo jaale ah, iyada oo saadaalisay heerkulka "sauna u eg" 35-37°C (111-133°F) iyo huurka 80% afarta maalmood ee soo socota ee dhulka gudaha. Heerkulka meelaha sida Turpan, Xinjiang, ayaa ku soo wajahan 48°C (111-133°F). Wuhan iyo Xiaogan, Hubei, waxay ku hoos jiraan digniin oranji ah, oo heerkulku ka sarreeyo 37°C meelaha qaar. Kuleylkan kulul, adduunka microscopic ee ka hooseeya dusha sare ee pipettes wuxuu la kulmaa khalkhal aan caadi ahayn - xasilloonida asiidhyada nuclei-ka, dhaqdhaqaaqa enzymes-ka, iyo xaaladda jireed ee reagents ayaa dhamaantood si aamusnaan leh u qalloociya hirarka kulaylka.

Soo saarista aashitada nukliyeerka waxay noqotay tartan ka soo horjeeda wakhtiga. Marka heerkulka dibadda uu ka sarreeyo 40 ° C, xitaa qaboojiyaha ayaa shid, heerkulka miiska qalliinka wuxuu badiyaa kor u dhaafaa 28 ° C. Waqtigan xaadirka ah, shaybaarada RNA ee bannaanka uga tagay waxay hoos u dhacayaan in ka badan laba jeer sida ugu dhakhsaha badan guga iyo deyrta. Soo saarista birta birlabka ah, xalinta kaydka waa mid maxali ah oo buuxsamay sababtuna tahay dardargelinta dareeraha dareeraha, iyo kiristaalo si fudud ayaa loo soo dajiyay. Kiristaalo-yadani waxay sababi doonaan isbeddelo waaweyn oo waxtarka qabsashada nucleic acid. Isbedbeddelka dareerayaasha organic-ga ah ayaa kor u kaca isku mar. Marka la joogo 30°C, qaddarka isbeddelka chloroformku waxa uu kordhay 40% marka la barbardhigo 25°C. Inta lagu jiro hawlgalka, waa lagama maarmaan in la hubiyo in xawaaraha dabaysha ee daboolka qiiqa uu yahay 0.5m/s, iyo isticmaal galoofyada nitrile si aad u ilaaliso waxtarka ilaalinta.

Tijaabooyinka PCR waxay la kulmaan xitaa khalkhal heerkul aad u adag. Reagen-yada sida Taq enzyme iyo reverse transcriptase ayaa aad xasaasi ugu ah isbedbedelka heerkulka degdega ah. Uumiga derbiyada tuubada ka dib marka laga saaro qaboojiyaha -20 ° C waxay keeni kartaa in ka badan 15% waxqabadyada enzymes oo lumaya haddii ay gasho habka falcelinta. Xalalka dNTP waxay sidoo kale muujin karaan hoos u dhac la ogaan karo ka dib 5 daqiiqo oo kaliya ee soo-gaadhista heerkulka qolka (> 30 ° C). Hawlgalka qalabka waxaa sidoo kale caqabad ku ah heerkulka sare. Marka heerkulka deegaanka shaybaadhku yahay>35°C iyo nadiifinta kulaylka ee qalabka PCR-ku aanu ku filnayn (<50 cm u jirta gidaarka), farqiga heerkulka gudaha wuxuu gaadhi karaa ilaa 0.8°C. Weecashadani waxay sababi kartaa hufnaanta xoojinta cidhifka saxan 96-ceel ah inay hoos u dhacdo in ka badan 40%. Shaandhooyinka boodhka waa in si joogto ah loo nadiifiyaa (ururka boodhka waxa ay yaraynaysaa wax ku oolnimada kulaylka 50%), waana in laga fogaadaa qaboojinta tooska ah. Intaa waxaa dheer, markaad samaynayso tijaabooyinka PCR habeenkii, iska ilaali inaad u isticmaashid qalabka PCR sidii "talagad ka samaysan" si aad u kaydiso muunada. Kaydinta 4°C in ka badan 2 saacadood waxay sababi kartaa uumi inuu sameeyo ka dib marka daboolka kululi uu xidho, oo nuugaysa nidaamka falcelinta oo ay suurtogal tahay inay daxaliyaan qaybaha birta ee qalabka.

Marka ay la kulmaan digniino heerkul sare oo joogto ah, shaybaarada molecular waa in ay sidoo kale dhawaaqaan digniinta. Saamballada qaaliga ah ee RNA waa in lagu kaydiyaa gadaasha qaboojiyaha -80°C, iyada oo gelitaanka ay xaddidan tahay xilliyo heerkul sare ah. Furitaanka albaabka qaboojiyaha -20°C in ka badan shan jeer maalintii waxay ka sii dari doontaa isbeddelka heerkulka. Qalabka kuleylka sare wuxuu u baahan yahay ugu yaraan 50 cm meel bannaan oo kulaylka ah ee labada dhinac iyo dhinacyada dambe. Intaa waxaa dheer, waxaa lagula talinayaa in dib loo habeeyo waqtiga tijaabada: 7: 00-10: 00 AM ee hawlgallada xasaasiga ah ee heerkulka sida soo saarista RNA iyo rarka qPCR; 1:00-4:00 galabnimo shaqo aan tijaabo ahayn sida falanqaynta xogta. Istaraatiijiyadani waxay si wax ku ool ah uga hortagi kartaa heerkulka sare ee ugu sarreeya inay farageliyaan tallaabooyinka muhiimka ah.

Tijaabooyinka molecular inta lagu jiro hirarka kulaylku waa tijaabinta farsamada iyo dulqaadka labadaba. Qorraxda xagaaga ee aan kala joogsiga lahayn, waxaa laga yaabaa inay tahay waqtigii aad dhigi lahayd pipettekaaga oo aad ku dari lahayd sanduuq baraf dheeraad ah shaybaarkaaga si loogu oggolaado qalabku inuu baabi'iyo kulayl badan. Ixtiraamka isbeddelka heerkulka ayaa si sax ah u ah tayada shaybaarka ugu qaalisan inta lagu jiro bilaha xagaaga ee kulul - ka dib, kulaylka 40 ° C xagaaga, xitaa molecules waxay u baahan yihiin si taxadar leh loo ilaaliyo "gobol polar artificial."