Hagaha Sayniska Xagaaga: Marka Hirarka Kulaylka 40°C uu la kulmo Tijaabooyinka Molecular-ka

Heerkulka sare ayaa dhawaan ka jiray inta badan Shiinaha. Luulyo 24, Kormeeraha Saadaasha Hawada ee Gobolka Shandong ayaa soo saaray digniin heer kul sare oo huruud ah, taasoo saadaalisay heerkulka "sauna u eg" oo ah 35-37°C (111-133°F) iyo 80% qoyaan afarta maalmood ee soo socota meelaha gudaha ah. Heerkulka meelaha sida Turpan, Xinjiang, wuxuu ku dhow yahay 48°C (111-133°F). Wuhan iyo Xiaogan, Hubei, waxay ku jiraan digniin oranji ah, iyadoo heerkulku uu ka badan yahay 37°C meelaha qaar. Kulaylkan kulul, adduunka yar ee ka hooseeya dusha sare ee pipette-yada ayaa la kulma khalkhal aan caadi ahayn - xasilloonida asiidhyada nukliyuulka, dhaqdhaqaaqa ensaymada, iyo xaaladda jireed ee reagents-ka dhammaantood si aamusnaan ah ayay u qalloociyaan hirarka kulaylka.

Soo saarista aashitada nukliyeerku waxay noqotay tartan ka dhan ah waqtiga. Marka heerkulka dibadda uu ka sarreeyo 40°C, xitaa marka qaboojiyaha hawada uu shidan yahay, heerkulka miiska qalliinka badanaa wuxuu ka sarreeyaa 28°C. Waqtigan xaadirka ah, muunadaha RNA ee lagu daayo bannaanka ayaa si ka badan laba jibaar u burbura sida gu'ga iyo dayrta. Soo saarista kuul birlab ah, xalka kaydka ah wuxuu ku jiraa meel maxalli ah sababtoo ah dardargelinta degdegga ah ee dareeraha, kiristaalo-na si fudud ayaa loo soo daadiyaa. Kiristaalo-yahan waxay sababi doonaan isbeddello waaweyn oo ku yimaada hufnaanta qabashada aashitada nukliyeerku. Isbeddelka dareeraha dabiiciga ah ayaa isku mar kordha. 30°C, xaddiga volatilization-ka chloroform wuxuu kordhaa 40% marka la barbar dhigo 25°C. Inta lagu jiro hawlgalka, waxaa lagama maarmaan ah in la hubiyo in xawaaraha dabaysha ee daboolka qiiqa uu yahay 0.5m/s, oo isticmaal galoofisyada nitrile si loo ilaaliyo waxtarka ilaalinta.

Tijaabooyinka PCR waxay la kulmaan khalkhal heerkul oo aad u adag. Waxyaabaha kiciya sida enzyme-ka Taq iyo reverse transcriptase aad bay ugu nugul yihiin isbeddellada heerkulka degdegga ah. Cimilada derbiyada tuubada ka dib marka laga saaro qaboojiyaha -20°C waxay sababi kartaa in ka badan 15% luminta dhaqdhaqaaqa enzyme-ka haddii ay gasho nidaamka falcelinta. Xalalka dNTP waxay sidoo kale muujin karaan burbur la ogaan karo ka dib 5 daqiiqo oo keliya oo ay ku dhacdo heerkulka qolka (>30°C). Hawlgalka qalabka waxaa sidoo kale carqaladeeya heerkulka sare. Marka heerkulka deegaanka shaybaarku uu yahay >35°C oo nadiifinta kulaylka ee qalabka PCR aysan ku filnayn (<50 cm derbiga), farqiga heerkulka gudaha wuxuu gaari karaa ilaa 0.8°C. Kala leexashadani waxay sababi kartaa hufnaanta ballaarinta geeska saxanka 96-god ah inuu hoos u dhaco in ka badan 40%. Shaandheeyayaasha boodhka waa in si joogto ah loo nadiifiyaa (ururinta boodhka waxay yareysaa hufnaanta kala jabka kulaylka 50%), waana in laga fogaadaa qaboojinta tooska ah ee hawada. Intaa waxaa dheer, marka la sameynayo tijaabooyinka PCR habeenkii, iska ilaali isticmaalka qalabka PCR sidii "qaboojiye maxalli ah" si loo kaydiyo muunadaha. Kaydinta heerkul ah 4°C in ka badan 2 saacadood waxay sababi kartaa in uumigu samaysmo ka dib marka daboolka kululaado, taasoo badinaysa nidaamka falgalka iyo suurtogalnimada inay mirto qaybaha birta ee qalabka.

Iyadoo ay la kulmaan digniino heerkul sare oo joogto ah, shaybaarrada molecular-ka waa inay sidoo kale dhawaaqaan digniinta. Shaybaarrada RNA ee qaaliga ah waa in lagu kaydiyaa gadaasha qaboojiyaha -80°C, iyadoo marin loo heli karo muddooyinka heerkulka sare. Furitaanka albaabka qaboojiyaha -20°C in ka badan shan jeer maalintii waxay sii xumeyn doontaa isbeddelka heerkulka. Qalabka dhaliya kulaylka sare wuxuu u baahan yahay ugu yaraan 50 cm oo meel bannaan oo kulaylka lagu kala diro labada dhinac iyo dhinacyada dambe. Intaa waxaa dheer, waxaa lagu talinayaa in dib loo habeeyo waqtiga tijaabada: 7:00-10:00 AM hawlgallada xasaasiga ah ee heerkulka sida soo saarista RNA iyo rarista qPCR; 1:00-4:00 PM shaqooyinka aan tijaabada ahayn sida falanqaynta xogta. Istaraatiijiyadani waxay si wax ku ool ah uga hortagi kartaa meelaha ugu sarreeya heerkulka sare inay farageliyaan tallaabooyinka muhiimka ah.

Tijaabooyinka molecular-ka inta lagu jiro hirarka kulaylka waa tijaabo labadaba farsamo iyo dulqaad. Qorraxda xagaaga ee aan kala joogsiga lahayn awgeed, waxaa laga yaabaa inay tahay waqtigii aad tuubadaada dhigi lahayd oo aad ku dari lahayd sanduuq baraf ah muunadahaaga si aad u oggolaato qalabku inuu daadiyo kulayl badan. Xushmaddan loo qabo isbeddellada heerkulka ayaa ah tayada shaybaarka ugu qaalisan bilaha xagaaga ee kulul - ka dib oo dhan, kulaylka 40°C ee xagaaga, xitaa molecules-ku waxay u baahan yihiin "gobolka cidhifka macmalka ah" oo si taxaddar leh loo ilaaliyo.